Komposisi kimia baja tahan karat 347 Besarnya darah vena atau kapiler, spesifik untuk SARS-CoV-2, respons sel T menentukan kekebalan terhadap COVID-19.

Terima kasih telah mengunjungi Nature.com.Anda menggunakan versi browser dengan dukungan CSS terbatas.Untuk pengalaman terbaik, kami menyarankan Anda menggunakan browser yang diperbarui (atau menonaktifkan Mode Kompatibilitas di Internet Explorer).Selain itu, untuk memastikan dukungan berkelanjutan, kami menampilkan situs tanpa gaya dan JavaScript.
Slider menampilkan tiga artikel per slide.Gunakan tombol kembali dan berikutnya untuk menelusuri slide, atau tombol pengontrol slide di akhir untuk menelusuri setiap slide.

347 komposisi kimia baja tahan karat

Komposisi Kimia Tabung Kumparan Stainless Steel 347

Komposisi kimia dan sifat mekanik tabung kumparan stainless steel 347 adalah sebagai berikut:
- Karbon – maks 0,030%.
- Kromium – 17-19%
- Nikel – 8-10,5%
- Mangan – maks 1%.

Sifat Mekanik Tabung Kumparan Stainless Steel 347

Menurut Produsen Tabung Coil Stainless Steel 347, Sifat Mekanik Tabung Coil 347:
- Kekuatan Tarik (psi) – 75.000 mnt
- Kekuatan Hasil (psi) – 30.000 mnt
- Perpanjangan (% dalam 2″) – 25% min
- Kekerasan Brinell (BHN) – maks 170

Aplikasi & Kegunaan Tabung Coil Stainless Steel 347

• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakan di Pabrik Gula.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakan dalam Pupuk.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakan di Industri.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 yang digunakan pada Pembangkit Listrik.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakan dalam Makanan dan Susu.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakan di Pabrik Minyak dan Gas.
• Produsen Tabung Coil Stainless Steel 347 yang digunakan dalam Industri Pembuatan Kapal.

Sel T spesifik SARS-CoV-2 dianggap dapat melindungi terhadap infeksi dan perkembangan COVID-19, namun belum ada bukti langsung mengenai hal ini.Di sini, kami membandingkan pengukuran darah lengkap sel T positif interferon-γ spesifik SARS-CoV-2 dengan hasil tes diagnostik COVID-19 positif (PCR dan/atau aliran lateral) dalam waktu 6 bulan setelah pengambilan darah Lian.Di antara 148 peserta yang mendonorkan sampel darah vena, besarnya respons sel T spesifik SARS-CoV-2 secara signifikan lebih tinggi pada mereka yang tetap terlindungi dibandingkan mereka yang terinfeksi (P <0,0001).% risiko infeksi, sedangkan intensitas tinggi mengurangi risiko ini menjadi 5,4%.Hasil ini digeneralisasikan ke 299 peserta tambahan yang menguji tes darah kapiler terukur yang dapat memfasilitasi akses terhadap data imunitas sel T skala populasi (14,9% vs. 4,4%).Oleh karena itu, pengukuran sel T spesifik untuk SARS-CoV-2 dapat memprediksi risiko infeksi dan harus dievaluasi saat memantau status kekebalan individu dan populasi.
Mengukur dan memahami respons imun terhadap infeksi SARS-CoV-2 penting untuk mengembangkan strategi masa depan yang efektif guna meminimalkan dampak wabah COVID-19 terhadap kesehatan masyarakat dan ekonomi di masa depan.Identifikasi korelasi imun akan memberikan informasi penting tentang kerentanan suatu populasi terhadap infeksi virus, kemungkinan peringatan dini akan puncak rawat inap, dan juga memungkinkan orang untuk secara pribadi mengelola risiko infeksi dan risiko menulari orang lain.Pengawasan imun telah terbukti penting untuk mengevaluasi efektivitas vaksin COVID-19 pada pasien sehat dan berisiko tinggi1,2,3 terutama pada mutan SARS-CoV-24, dan deteksi imunokompromais berarti perlunya meningkatkan imunitas. Dapatkan vaksinasi dan pencegahan wabah di masa depan.
Tingkat kekebalan seseorang terhadap infeksi SARS-CoV-2 bergantung pada beberapa faktor: viral load pada saat terpapar, varian virus, usia, status vaksinasi/infeksi sebelumnya, penyakit penyerta, pengobatan, dan yang paling penting, infeksi anti-SARS-CoV. .2 Respon imun adaptif terjadi pada saat terpapar virus5.Evaluasi respons imun terhadap infeksi dan/atau vaksinasi SARS-CoV-2 berfokus pada uji serologis yang mengukur keberadaan antibodi spesifik untuk protein struktural (misalnya lonjakan glikoprotein).Namun, ada atau tidaknya antibodi saja tidak secara akurat menentukan respons imun protektif, karena respons tersebut melemah secara signifikan seiring berjalannya waktu6 dan netralisasi varian SARS-CoV-2 pada individu yang pulih atau menerima vaksinasi ganda. jumlah terobosan infeksi7.Memang benar, perlindungan terhadap gejala COVID-19 yang disebabkan oleh varian Omicron (B.1.1.529) berkurang menjadi sekitar 10% hanya setelah 4-6 bulan vaksinasi mRNA, meskipun perlindungan terhadap penyakit parah tetap bertahan >68% selama setidaknya 7 bulan8 .Mengukur respons sel T memori adaptif, yang memberikan perlindungan jangka panjang terhadap infeksi virus, merupakan indikator kerentanan terbaik terhadap infeksi SARS-CoV-2, dan oleh karena itu merupakan indikasi yang lebih baik mengenai risiko hasil tes positif COVID-199, karena T spesifik sel dapat mencegah infeksi.tanpa serokonversi10,11.Namun, pengukuran respon sel T kurang mendapat perhatian karena kesulitan metodologi dan masalah logistik dalam memperoleh dan mengangkut sampel darah vena, terutama ketika melakukan studi observasional besar untuk menilai kemanjuran vaksin dan memantau kekebalan.Namun, individu yang divaksinasi menunjukkan aktivitas sel T yang kuat terhadap varian SARS-CoV-2, sehingga berpotensi mengimbangi hilangnya reaktivitas antibodi untuk membatasi keparahan COVID-1912,13.
Di sini, kami berupaya memahami apakah pengukuran tunggal respons sel T SARS-CoV-2 dapat memprediksi risiko absolut infeksi SARS-CoV-2 dalam waktu 6 bulan setelah pengambilan sampel darah, terlepas dari faktor-faktor yang memengaruhi kekebalan sebelumnya.Agar tes sel T memiliki hasil yang tinggi dan dapat diterapkan pada penelitian yang lebih besar, kami juga mencoba membuat tes tersebut diperkecil sehingga dapat dilakukan dengan menggunakan sampel darah ujung jari kapiler.
Kami mengukur respons imun seluler dan humoral pada donor sehat menggunakan deteksi gabungan sel T SARS-CoV-2 dan antibodi IgG berdasarkan darah vena utuh (untuk karakteristik peserta, lihat Maret 2022 14. Pada donor yang divaksinasi, SARS-CoV-2- respons seluler T spesifik ditentukan dengan mengukur kadar interferon-γ plasma (IFN-γ) setelah stimulasi darah lengkap dengan peptida SARS-CoV-2 (seperti sebelumnya, referensi 14,15,16,17,18) dan respons IgG terkait dengan nukleokapsid (N) meningkat pada mereka yang melaporkan infeksi sebelumnya, meskipun kedua respons tersebut lebih tinggi pada donor yang sebelumnya terinfeksi yang tidak divaksinasi, maksimal di dalam tubuh (Gambar 1a,b).Respon IgG terhadap lonjakan glikoprotein (RBD, S1, S2) tertinggi terjadi pada donor yang telah divaksinasi sebelumnya (Gambar 1c – e).
respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 diukur dengan uji darah lengkap vena dan berdasarkan pada vaksinasi peserta dan status infeksi SARS-CoV-2 sebelumnya (dikonfirmasi melalui PCR dan/atau uji aliran lateral)' Vac + /Inf +' n = 60 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 1 (tidak diterapkan).Reaksi pengikatan IgG spesifik SARS-CoV-2 menargetkan nukleokapsid (“N”) (b; ****P < 0,0001, **P = 0,0016), domain pengikat reseptor berduri (“RBD”) (c; ** P = 0.0022, *P < 0.015), subunit lonjakan 1 (“S1”) (d; ***P = 0.0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0.022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) dan puncak subunit 2 (“S2”) (e) diukur dengan tes darah lengkap vena dan berdasarkan vaksinasi peserta dan SARS -CoV-2 sebelumnya (dikonfirmasi dengan PCR dan/ atau tes aliran lateral) status infeksi.'Vac + /Inf +' n = 60 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning).Perbandingan dilakukan dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis, disesuaikan untuk beberapa perbandingan menggunakan uji Dunn.Data ditampilkan dalam bentuk grafik (garis tengah pada median, batas atas pada persentil ke-75, batas bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili donor.Data mentah disediakan dalam bentuk file data mentah.
Setelah pengambilan sampel darah, peserta diminta untuk melaporkan sendiri hasil tes PCR dan/atau aliran lateral positif COVID-19;jika peserta dinyatakan positif antara 1 September 2021 dan 29 Desember 2021, mereka dianggap terinfeksi virus corona varian Delta (B.1.617.2) dan Omicron (B.1.1.529) ke Public Health Wales setelah 29 Desember 2021, ketika pilihan kekhawatiran ini menjadi dominan.Di antara 148 pendonor yang dapat dievaluasi, kami mengamati tingkat infeksi sebesar 26,3% (39/148) dalam waktu 6 bulan setelah donor darah, 38 di antaranya menerima dosis kedua atau ketiga vaksin COVID-19 (terobosan infeksi terjadi setelah Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) vaksin mRNA atau vaksin AstraZeneca (ChAdOx1 nCoV-19));donor yang tidak divaksinasi juga terinfeksi.Besarnya respons sel T IFN-γ-positif spesifik SARS-CoV-2 secara signifikan lebih rendah pada mereka yang melaporkan tes diagnostik positif untuk COVID-19 dibandingkan pada donor yang tidak terinfeksi (P <0,0001; Gambar 2a), terutama karena induksi optimal respons sel T melalui vaksinasi pada beberapa peserta (P = 0,050; Gambar Tambahan 1).Tidak ada korelasi antara besarnya respons sel IFN-γ+ T dan waktu untuk mendapatkan hasil tes positif COVID-19 (Gambar Tambahan 2).Sebaliknya, baik respons IgG yang mengikat RBD-, S1-, S2 (Gambar 2b–d) maupun respons antibodi penetralisir RBD-, S1 tidak spesifik untuk SARS-CoV-2 tipe liar atau delta (B.1.617).) (Gambar Tambahan 3) dapat membedakan orang yang berisiko tertular.Namun, respons IgG terkait-N yang rendah terhadap SARS-CoV-2 berkorelasi dengan risiko infeksi COVID-19 (P = 0,0084; Gambar 2e);mereka yang dites positif memiliki kemungkinan 85% lebih kecil (P = 0,00035; OR 0,15, 95).% CI: 0,047–0,39 (Gambar Tambahan 4).
Sampel darah vena dari donor sehat (n = 148) menilai respons sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 (a; ****P <0,0001) dan pengikatan reseptor Spike ke SARS-CoV spesifik -2 rangsangan.domain (“RBD”) (b), subunit spike 1 (“S1″) (c), subunit spike 2 (“S2″) (d), dan nukleokapsid (“N”) (e; **P = 0,0084 ) .Peserta yang dinyatakan positif COVID-19 (PCR dan/atau aliran lateral) teridentifikasi;semua infeksi terjadi dalam waktu 6 bulan setelah pengambilan sampel darah.Perbandingan dilakukan dengan menggunakan uji Mann-Whitney dua sisi.Data ditampilkan dalam bentuk grafik (garis tengah pada median, batas atas pada persentil ke-75, batas bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili donor.tidak penting.Peta panas f menunjukkan korelasi peringkat Spearman antar variabel untuk kumpulan data yang ditentukan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikeluarkan dari matriks dan ditandai dengan sel kosong.Data mentah disediakan dalam bentuk file data mentah.
Batas positif diagnostik yang ditetapkan sebesar 14 dianggap terlalu sewenang-wenang untuk menilai risiko infeksi ulang, sehingga rentang antarkuartil ditetapkan untuk menetapkan parameter risiko absolut.Model statistik, yang hanya memasukkan variabel-variabel yang memiliki pengaruh signifikan terhadap hasil, menunjukkan bahwa besarnya respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 adalah biomarker imun yang paling penting untuk menentukan peluang seseorang terkena penyakit. diuji untuk COVID.-19 positif (Gambar 2f dan Gambar Tambahan 4).Pasien dengan respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 pada kuartil ketiga (194-489 pg/ml IFN-γ) dan keempat (>489 pg/ml IFN-γ) 65% (P = 0,055; OR 0,35, 95% CI: 0,11–1,00) dan 90% (P = 0,0050; OR 0,098, 95% CI: 0,014–0,42) memiliki lebih banyak peserta.Kemungkinannya kecil (Gambar Tambahan 4).Secara keseluruhan, peserta dengan respons sel T spesifik SARS-CoV-2 dari darah vena ≤79 pg/mL IFN-γ memiliki risiko 43,2% mengalami infeksi terobosan dalam 6 bulan, dibandingkan dengan respons >489 pg/mL.ml IFN-γ memiliki risiko infeksi sebesar 5,4% (tabel 2).
Tes darah lengkap vena terbatas cakupannya karena perlunya pengambilan sampel oleh ahli phlebotomist.Untuk meningkatkan ketersediaan pengujian sel T dan IgG untuk SARS-CoV-2, metode pengambilan sampel darah kapiler alternatif telah dikembangkan agar peserta dapat memperoleh sampel darah dari jari di rumah.Sejauh pengetahuan kami, belum ada laporan sebelumnya mengenai pengukuran fungsi sel T spesifik antigen dalam sampel darah kapiler.Korelasi yang kuat sebelumnya telah ditunjukkan antara jumlah limfosit yang diperoleh dengan menggunakan sampel darah kapiler dan vena yang sebanding.Selain itu, telah dilaporkan bahwa tes berbasis darah lengkap yang mengukur respons sel T spesifik SARS-CoV-2 hanya menggunakan 320 μL darah vena,20 menghilangkan kekhawatiran tentang frekuensi sel T progenitor dalam sampel darah kapiler.
Kami menggunakan uji kolaboratif standar dengan throughput tinggi terhadap sel T SARS-CoV-2 dan antibodi IgG berdasarkan darah lengkap kapiler untuk mengukur respons imun seluler dan humoral pada peserta dengan berbagai penyakit penyerta dan status vaksinasi/infeksi sebelumnya (Tabel 1).direkrut dari seluruh Inggris antara 24 Januari dan 14 Maret 202214. Mayoritas (90,9%) sampel jari diperoleh dengan benar dan dikirim ke laboratorium dalam waktu 24 jam setelah pengumpulan.Dalam beberapa kasus, sampel diterima dalam waktu 48 jam setelah pengambilan darah, tetapi tidak satupun dari sampel ini lolos pemeriksaan kendali mutu dan tidak mempengaruhi keseluruhan pengukuran sel T atau antibodi (Gambar Tambahan 5).Meskipun terdapat perbedaan besarnya respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 yang diukur pada masing-masing sampel darah kapiler dan vena pada beberapa individu, secara keseluruhan tidak ada perbedaan yang signifikan (P = 0,88; Gambar Tambahan 6 ).).
Respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 meningkat secara signifikan pada individu yang divaksinasi dan juga melaporkan infeksi sebelumnya (P = 0,0001), namun tidak lebih tinggi secara signifikan dibandingkan pada individu donor yang tidak divaksinasi dan terinfeksi sebelumnya (P = 0,19, Gambar 2). 3a).).Respons IgG terhadap lonjakan glikoprotein (RBD, S1, S2) secara signifikan lebih tinggi pada donor yang divaksinasi dibandingkan pada donor yang tidak divaksinasi, terlepas dari status infeksi sebelumnya (Gambar 3b-d).Menariknya, rata-rata respons IgG terikat N paling tinggi pada peserta yang sebelumnya terinfeksi dan tidak divaksinasi dibandingkan dengan peserta yang divaksinasi, meskipun hal ini tidak mencapai signifikansi (Gambar 3e).Di antara donor yang tidak divaksinasi dan tidak terinfeksi yang menyatakan diri, 15 dari 37 (40,5%) peserta positif memiliki N-linked IgG, di atas ambang batas yang ditetapkan sebelumnya yaitu 2,0 BAU/mL14;15 peserta ini Dua belas dari pasien ini dinyatakan positif terhadap respons sel IFN-γ+ T di atas ambang batas yang ditetapkan sebelumnya yaitu 22,7 pg/mL IFN-γ14.Oleh karena itu, kemungkinan besar peserta tersebut sebelumnya pernah terinfeksi SARS-CoV-2 dan tidak dites COVID-19 karena pilihan pribadi, kurangnya peralatan PCR dan/atau aliran lateral, atau tidak menunjukkan gejala.Meskipun ada korelasi yang signifikan antara respons sel T terhadap IFN-γ+ dan kadar IgG terkait-N pada donor yang tidak divaksinasi (P = 0,0044; Gambar Tambahan, respons IgG terkait-N menurun lebih cepat dibandingkan respons IgG terkait-N, sedangkan IFN-γ + Respons sel T dipertahankan terlepas dari status vaksinasi, meskipun jumlah donor pada 50 minggu pasca-tantangan rendah (Gambar Tambahan 8). Jenis vaksinasi umumnya sedikit berbeda dalam respons IgG yang diamati khusus untuk SARS-CoV-2, T sel dan terkait RBD, meskipun peserta yang menerima dua dosis BNT162b2 diikuti dengan vaksinasi ulang mRNA1273 menunjukkan tingkat sel IFN-γ + T yang jauh lebih tinggi lebih sensitif terhadap SARS-CoV-2 dibandingkan mereka yang menerima dua dosis ChAdOx1 dan BNT162b2 (Tambahan Gambar 9) Selain itu, penyakit penyerta yang dilaporkan memiliki sedikit perbedaan keseluruhan dalam respons sel T yang diamati dibandingkan dengan donor sehat (Gambar Tambahan 10).
respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 diukur dengan uji kapiler darah lengkap dan didasarkan pada vaksinasi peserta dan status infeksi SARS-CoV-2 sebelumnya (dikonfirmasi melalui PCR dan/atau uji aliran lateral).'Vac + /Inf +' n = 42 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 158 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 33 (kuning), 'Vac- /Inf-' n = 37 (abu-abu).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac- /Inf-) P = 0,014 .Reaksi pengikatan IgG spesifik SARS-CoV-2 terhadap spike receptor binding domain (“RBD”) (b; ****P < 0,0001, ns: tidak signifikan), spike subunit 1 (“S1”) (c; * * **P < 0,0001, ns: tidak signifikan), subunit lonjakan 2 (“S2″) (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016 ) dan nukleokapsid (“N”) (e; ****P <0,0001, ns tidak signifikan) diukur menggunakan analisis darah lengkap vena dan berdasarkan vaksinasi peserta dan SARS-CoV-2 sebelumnya (dikonfirmasi dengan PCR dan/atau analisis aliran lateral) Infeksi dibagi lagi menjadi status.'Vac + /Inf +' n = 46 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 182 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 34 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 37 (abu-abu).Perbandingan dilakukan dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis, disesuaikan untuk beberapa perbandingan menggunakan uji Dunn.Data ditampilkan dalam bentuk grafik (garis tengah pada median, batas atas pada persentil ke-75, batas bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili donor.Data mentah disediakan dalam bentuk file data mentah.
Seperti sebelumnya, peserta diminta untuk melaporkan hasil PCR dan/atau aliran darah lateral positif COVID-19;menurut Badan Kesehatan Inggris, peserta dianggap telah terinfeksi virus corona Omicron (B.1.1.529) pada saat pengujian varian virus positif, karena merupakan varian dominan di Inggris selama masa penelitian.Di antara 299 donor yang dapat dievaluasi, kami mengamati tingkat infeksi sebesar 8,0% (24/299) dalam waktu tiga bulan setelah donor kapiler, tujuh di antaranya tidak divaksinasi.Proporsi penyakit penyerta di antara seluruh peserta lebih rendah pada mereka yang dites positif COVID-19 (10,7%) dibandingkan mereka yang dites negatif COVID-19 (24,4%, Tabel 1), hal ini mungkin disebabkan oleh fakta bahwa peserta dengan penyakit tertentu penyakit lebih berhati-hati dan melindungi terhadap konsekuensi potensial seperti diabetes dan kanker.Seperti yang diamati dalam kohort darah vena, sel T positif interferon-γ (IFN-γ) spesifik SARS-CoV-2 diukur dalam sampel darah kapiler dari individu yang melaporkan tes diagnostik positif untuk COVID-19.Besarnya respons secara signifikan lebih rendah dibandingkan pada donor yang tidak terinfeksi (P = 0,034; Gambar 4a) karena induksi respons sel T yang relatif buruk melalui vaksinasi dan/atau infeksi sebelumnya (Gambar Tambahan 11).Demikian pula, baik respons IgG yang mengikat RBD-, S1-, S2 (Gambar 4b–d) maupun respons antibodi penetralisir RBD-, S1 tidak spesifik untuk SARS-CoV-2 tipe liar atau delta (B. 1.617).(Gambar tambahan 12).Individu yang mempunyai risiko infeksi yang signifikan dapat diidentifikasi.Berbeda dengan kohort vena, respons IgG terkait N juga tidak membedakan risiko COVID-19 (Gambar 4e), yang menunjukkan bahwa varian Omicron (B.1.1.529) meningkatkan penghindaran kekebalan pada individu yang sebelumnya terinfeksi, seperti yang baru-baru ini dijelaskan 21. Sebaliknya, kekuatan respons sel IFN-γ T spesifik SARS-CoV-2 sekali lagi merupakan variabel terpenting dalam menentukan peluang individu untuk dites positif COVID-19 (Gambar 4f).Secara keseluruhan, peserta dengan respons sel T kapiler spesifik SARS-CoV-2 ≤23,7 pg/mL IFN-γ memiliki risiko infeksi sebesar 14,9% dalam tiga bulan dibandingkan dengan respons >141,6 pg/mL.ml JIKA.-γ memiliki risiko infeksi sebesar 4,4% (Tabel 2).
Respons sel IFN-γ+ T spesifik untuk SARS-CoV-2 (a; *P = 0,034) dan domain pengikat reseptor bertarget IgG (“RBD”) spesifik SARS-CoV-2 (b), spike subunit 1 (' S1′) (c), lonjakan subunit 2 ('S2′) (d) dan reaksi pengikatan nukleokapsid ('N') (e).Peserta diidentifikasi positif tes COVID-19 (PCR dan/atau tes aliran darah lateral), semua infeksi terjadi dalam waktu 3 bulan setelah pengambilan sampel darah.Perbandingan dilakukan dengan menggunakan uji Mann-Whitney dua sisi.Data ditampilkan dalam bentuk grafik (garis tengah pada median, batas atas pada persentil ke-75, batas bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili donor.tidak penting.Peta panas f menunjukkan korelasi peringkat Spearman antar variabel untuk kumpulan data yang ditentukan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikeluarkan dari matriks dan ditandai dengan sel kosong.Data mentah disediakan dalam bentuk file data mentah.
Saat kita memasuki fase pandemi COVID-19 berikutnya, fokusnya akan beralih dari pencegahan ke manajemen risiko individu dan mengidentifikasi anggota masyarakat yang rentan.Membangun korelasi antara kekebalan terhadap COVID-19 sangat penting untuk mengidentifikasi dan menangani kelompok berisiko tinggi ini secara efektif.Kini semakin banyak bukti bahwa kekebalan sel T melindungi terhadap infeksi SARS-CoV-2 dan membatasi keparahan COVID-1910.Data yang disajikan di sini menunjukkan bahwa gabungan kekuatan respons sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 terhadap protein struktural spike, membran, dan nukleokapsid memberikan perlindungan yang lebih besar terhadap COVID-19 dibandingkan dengan pengikatan antibodi.19 mendorong atau menetralisir respons .dan harus diperhitungkan ketika menilai kekebalan individu dan/atau kelompok.Virus RNA seperti SARS-CoV-2 atau virus influenza A (IAV) menghindari netralisasi serologis dengan mengembangkan epitop sel B yang terpapar secara cepat pada antigen permukaan yang dikenali oleh antibodi.Respons imun protektif yang diberikan oleh sel T mungkin mencerminkan penargetan epitop dari wilayah protein virus yang lebih terpelihara yang tidak dapat dengan cepat lepas dari respons imun.Perlindungan yang dimediasi sel T terhadap varian baru SARS-CoV-2 serupa dengan perlindungan heterosubtipe yang dimediasi oleh sel T yang menargetkan protein intrinsik yang dilestarikan seperti yang terlihat pada subtipe IAV22,23.
Meskipun terdapat potensi besar dalam mengukur respons imun seluler terhadap COVID-19, relatif sedikit perhatian yang diberikan pada pengembangan pengujian sel T yang akurat, memiliki throughput tinggi, dan terstandarisasi.Kompleksitas dan biaya tradisional yang terkait dengan pengukuran respons sel T menghalangi penentuan imunitas sel T secara akurat ketika melakukan skrining untuk imunitas populasi besar.Meskipun beberapa tes stimulasi peptida darah utuh komersial baru-baru ini tersedia, semua orang saat ini memerlukan ahli phlebotomist untuk mendapatkan darah, sehingga membatasi ketersediaan dan skalanya.Sistem darah kapiler banyak digunakan untuk menentukan prevalensi antibodi SARS-CoV-2 dalam suatu populasi.Kami mengadaptasi tes darah kapiler untuk melakukan tes stimulasi peptida darah lengkap guna menilai reaktivitas sel T terhadap protein struktural SARS-CoV-2 dan respons antibodi spesifik SARS-CoV-2.Faktanya, pengukuran gabungan antibodi spesifik SARS-CoV-2 dan sel T dalam sampel darah kapiler yang sama sangat menarik: (i) mengurangi kebutuhan beberapa tes darah per peserta, (ii) meningkatkan pengalaman dan pemahaman peserta;(iii) meningkatkan logistik dan mengurangi duplikasi, (iv) mengurangi dampak lingkungan karena lebih sedikit bahan habis pakai laboratorium dan pengiriman sampel yang diperlukan.Meskipun reaktivitas IFN-γ secara keseluruhan serupa antara sampel darah vena dan kapiler yang cocok, reaktivitas tersebut diamati lebih rendah pada kelompok darah kapiler peserta (Gambar 4a) dibandingkan dengan kelompok darah vena (Gambar 2a).Nilai IFN-γ Ada beberapa penjelasan untuk temuan ini, yaitu sejumlah besar peserta dengan penyakit penyerta yang memerlukan terapi imunosupresif direkrut ke dalam kelompok pengambilan sampel darah kapiler (Tabel 1) dan Viabilitas dan/atau fungsi sel T yang diperoleh dari pembuluh darah. sampel mungkin rendah, terutama dengan mempertimbangkan kondisi penyimpanan sampel jangka panjang sebelum stimulasi peptida.
Vaksin COVID-19 yang tersedia secara luas saat ini memberikan perlindungan terbaik terhadap penyakit parah bagi sebagian besar penerima dalam waktu 6 bulan setelah vaksinasi8.Yang menggembirakan, meskipun netralisasi serologis varian SARS-CoV-26,7 yang diinduksi vaksin buruk, respons sel T yang ditimbulkan oleh vaksinasi terhadap SARS-CoV-2 tipe liar tetap sangat reaktif, seiring dengan munculnya 25 varian lainnya.Data yang kami sajikan di sini menunjukkan pentingnya penilaian imunogenisitas vaksin yang lebih luas, dengan menyoroti vaksin dengan kekebalan sel T yang tidak mencukupi untuk mencegah infeksi mendadak dan penularan virus yang terus-menerus.Kami juga mengamati bahwa banyak individu yang tidak divaksinasi yang direkrut ke dalam kelompok kapiler memiliki respons yang signifikan terhadap sel T spesifik SARS-CoV-2 (dan IgG pengikat N) terlepas dari vaksinasi sebelumnya, yang kemungkinan besar disebabkan oleh infeksi sebelumnya.Daripada memvaksinasi individu yang tepat, risiko infeksi mereka harus dinilai berdasarkan status imunisasi mereka saat ini dan pilihan yang diambil.
Keterbatasan penelitian ini mencakup jaminan bahwa peserta melaporkan sendiri infeksi SARS-CoV-2 setelah pengambilan darah untuk menentukan relevansi kekebalan;beberapa peserta mungkin mengalami infeksi tanpa gejala dan tidak dapat menjalani tes PCR dan/atau aliran lateral untuk COVID-19.Kumpulan data kami juga kekurangan informasi tentang pengobatan peserta pada saat pengambilan sampel darah.Selain itu, mengingat semua peserta kami hanya melaporkan gejala ringan/sedang atau tanpa gejala, tidak mungkin mengidentifikasi respons imun dari kumpulan data kami yang memperkirakan peningkatan risiko penyakit parah dan rawat inap akibat COVID-19.Namun, kehadiran respons sel T CD8+ terhadap epitop spesifik nukleokapsid baru-baru ini dikaitkan dengan perlindungan terhadap COVID-1926 yang parah.Selain itu, pengujian yang digunakan di sini tidak mengukur respons sel T terhadap protein non-struktural SARS-CoV-2 spesifik yang diekspresikan awal, yang baru-baru ini terbukti terakumulasi pada petugas layanan kesehatan seronegatif yang telah melakukan kontak dengan pasien yang terinfeksi.Berdasarkan penelitian ini, mengingat prevalensi penularan komunitas pada saat perekrutan dan tingginya kemungkinan infeksi kontak dalam populasi, jumlah sel T spesifik SARS-CoV-2 yang ditemukan dalam pengujian kami juga tampaknya mampu menghilangkan penyakit tersebut.infeksi subklinis dalam kelompok kami.Terakhir, kami tidak mengukur produksi interleukin 2 oleh sel T karena penelitian kami sebelumnya menunjukkan buruknya identifikasi respons sel T spesifik SARS-CoV-214, meskipun respons spesifik IL-2 mungkin mengindikasikan reaktivitas silang yang sudah ada sebelumnya.sel yang terkait dengan pertahanan terhadap infeksi SARS-CoV-211.
Secara keseluruhan, data-data ini menyoroti kebutuhan mendasar akan studi longitudinal jangka panjang yang menggabungkan respons sel T spesifik SARS-CoV-2 ke dalam pengukuran imunitas skala populasi.Upaya ini dapat dibantu dengan pengembangan tes darah kapiler baru yang mengukur respons sel T.
Proyek penelitian ini merekrut peserta dari Februari 2021 hingga Maret 2022. Kelompok donor sehat (n = 148) yang mendonorkan sampel darah vena sebagian besar terdiri dari staf universitas dan mahasiswa yang berpartisipasi dalam layanan pemeriksaan COVID-19 di Universitas Cardiff atau staf di sekolah dasar di Cardiff.Semua peserta dinyatakan sehat dan tidak melaporkan mengonsumsi obat imunosupresif apa pun (lihat Tabel 1 untuk karakteristiknya).Kelompok peserta yang mendonorkan sampel darah kapiler mencakup semua donor sukarela (berusia 18+) dari seluruh Inggris.Antara 24 Januari dan 14 Maret 2022, 342 peserta terdaftar dalam penelitian ini, 299 di antaranya menyerahkan sampel darah ke laboratorium.Banyak peserta yang belum menerima vaksinasi dan/atau melaporkan adanya penyakit penyerta yang serius, termasuk penyakit autoimun dan kanker (lihat Tabel 1 untuk mengetahui karakteristiknya).Penelitian ini mendapat persetujuan etis dari Komite Etika Penelitian Newcastle dan North Tyneside 2 (ID IRAS: 294246) dan Komite Etika Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Cardiff (SREC ref: SMREC 21/01).Semua peserta memberikan persetujuan tertulis sebelum dimasukkan.Peserta tidak menerima kompensasi apa pun untuk berpartisipasi dalam penelitian ini.
Sampel darah vena diperoleh dengan pungsi vena ke dalam 6 atau 10 ml litium atau natrium heparin vacutainer (BD).Sampel darah kapiler diambil dengan lanset jari kemudian ditampung dalam mikrokontainer heparin (BD).Dibutuhkan minimal 400 μl darah;sampel apa pun yang kurang dari jumlah ini akan ditolak.Alasan lain penolakan sampel termasuk koagulasi masif dan/atau hemolisis dan kegagalan mengumpulkan plasma kental untuk dianalisis (Gambar Tambahan 5).Sebanyak 299 sampel darah kapiler tersedia untuk menilai respons antibodi, dimana 270 sampel juga tersedia untuk menilai respons sel T.
Respons sel T spesifik SARS-CoV-2 dinilai menggunakan uji Immuno-T COVID-19 (ImmunoServ Ltd) dan dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya14.Secara singkat, satu vacutainer vena natrium heparin (BD) berukuran 6 ml atau 10 ml diambil dari masing-masing peserta dan diproses di laboratorium dalam waktu 12 jam setelah pengambilan darah.Meskipun sebagian besar spesimen diproses dalam waktu 24 jam, satu darah kapiler heparinized microbleeding (BD) berukuran 400-600 μl dikumpulkan dalam waktu 48 jam setelah pengambilan sampel jari.Sampel darah vena dan/atau kapiler distimulasi dengan kumpulan peptida terpisah yang spesifik untuk SARS-CoV-2 (varian tipe liar) seperti yang dijelaskan sebelumnya14.Perpustakaan peptida ini berisi 420 rangkaian 15-mer dengan 11 asam amino yang tumpang tindih yang mencakup seluruh protein lonjakan (S1 dan S2) (S; protein NCBI: QHD43416 1), fosfoprotein nukleokapsid (NP; protein NCBI: QHD43423 2) dan membran glikoprotein (M ; Protein NCBI: QHD43419 1) urutan pengkodean (disebut sebagai “perpustakaan peptida kombinatorial S-/NP-/M”).Semua peptida dimurnikan hingga >70%, dilarutkan dalam air steril dan digunakan pada konsentrasi akhir 0,5 μg/ml per peptida.Sampel diinkubasi pada suhu 37°C selama 20-24 jam.Tabung kemudian disentrifugasi pada 5000×g selama 3 menit dan ~150 μl plasma dikumpulkan dari bagian atas setiap sampel darah.Simpan sampel plasma pada suhu -20°C hingga satu bulan sebelum menjalankan pengujian deteksi sitokin/antibodi.
IFN-γ diukur menggunakan IFN-γ ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, nomor katalog 430116) dan dilakukan sesuai dengan instruksi pabrik.Segera setelah larutan berhenti (2N H2SO4) ditambahkan, pelat mikro dibaca pada 450 nm menggunakan pembaca pelat ELISA BioLegend Mini.IFN-γ diukur dengan ekstrapolasi kurva standar menggunakan GraphPad Prism.Nilai di bawah batas deteksi bawah pengujian dicatat sebagai 7,8 pg/ml, nilai di atas batas deteksi atas pengujian dicatat sebagai 1000 pg/ml.
Antibodi IgG Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N diukur menggunakan panel 4-plex Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 (Bio-Rad, cat. no. 12014634) dan diberi label sesuai dengan instruksi manufaktur .instruksi.Nilai pelaporan sampel di atas batas kuantisasi dianalisis kembali pada pengenceran 1:1000.Intensitas fluoresensi rata-rata manik-manik diukur pada instrumen Bio-Plex 200 (Bio-Rad).Konsentrasi antibodi dihitung dengan uji kontrol tunggal VIROTROL SARS-CoV-2 (Bio-Rad) dan dikonversi ke Unit Standar Referensi Internasional (BAU/mL) WHO/NIBSC 20/136 menggunakan faktor kalibrasi pabrikan.
Antibodi penetral spesifik subunit RBD dan S1 terhadap SARS-CoV-2 tipe liar dan delta (B.1.617) Garis SARS-CoV-2 diukur menggunakan Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio -Rad , bagian no.12016897), sesuai dengan instruksi pabriknya.Ukur intensitas fluoresensi rata-rata pada Bio-Plex 200 (Bio-Rad) dan hitung persen penghambatan (yaitu netralisasi) menggunakan rumus berikut:
Uji netralisasi infeksi SARS-CoV-2 dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya28.Secara singkat, 600 PFU SARS-CoV-2 tipe liar diinkubasi dengan pengenceran plasma serial 3 kali lipat dalam rangkap dua selama 1 jam pada suhu 37°C.Campuran tersebut kemudian ditambahkan ke sel VeroE6 selama 48 jam.Lapisan tunggal difiksasi dengan paraformaldehyde 4%, diresapi dengan 0,5% NP-40 dan diinkubasi selama 1 jam dalam buffer pemblokiran (PBS mengandung 0,1% tween dan 3% susu skim).Antibodi primer (anti-nukleokapsid 1C7, Stratech) ditambahkan ke buffer pemblokiran selama 1 jam pada suhu kamar.Setelah dicuci, antibodi sekunder (IgG-HRP anti-tikus, Pierce) ditambahkan ke buffer pemblokiran selama 1 jam.Lapisan tunggal dicuci, dikembangkan menggunakan OPD Sigmafast dan dibaca pada pembaca pelat Clariostar Omega.Sumur tanpa virus, tanpa virus tetapi tanpa antibodi, dan serum yang dinormalisasi yang menunjukkan aktivitas antara dimasukkan dalam setiap percobaan sebagai kontrol.
Analisis statistik dilakukan di GraphPad Prism (versi 9.4.1).Normalitas kumpulan data diuji dengan menggunakan uji Shapiro-Wilk.Kriteria non-parametrik digunakan untuk semua perbandingan.Uji Mann-Whitney digunakan untuk sampel tidak berpasangan.Semua tes dilakukan dua sisi dengan ambang signifikansi nominal P ≤ 0,05.
Analisis eksplorasi awal kumpulan data dilakukan di R (versi 4.0.3).Hal ini mencakup pengembangan matriks korelasi peringkat univariat Spearman, dimana korelasi antara dua variabel diwakili oleh ukuran dan warna kotak.Signifikansi statistik antar asosiasi dihitung menggunakan Spearman's rho, di mana nilai ≤0,05 dianggap signifikan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikeluarkan dari matriks dan ditandai dengan sel kosong.Nilai-P disesuaikan untuk beberapa perbandingan menggunakan koreksi Holm.Model regresi logistik biner digunakan untuk mensimulasikan pengaruh variabel dalam kumpulan data terhadap respons positif terhadap COVID-19.Respon sel T IFN-γ dan skor titer IgG anti-RBD/S1/S2/N diubah menjadi faktor, di mana setiap individu ditempatkan pada kuartil yang sesuai untuk setiap skor.Setelah itu dikembangkan model penelitian awal menggunakan fungsi glm pada paket statistik (V4.0.3).Rasio odds yang diperoleh dari model asli ini diekstraksi dari koefisien model menggunakan fungsi 'odds_plot' dalam paket OddsPlotty (V1.0.2).Saat mengembangkan model validasi silang, kami menggunakan fungsi “bestglm” dari paket bestglm (V0.37.3) untuk membatasi bias pengguna dan memastikan bahwa subset prediktor terbaik dapat dipilih.Metode yang dipilih adalah “menyeluruh” dan kriteria informasi yang digunakan untuk menilai kesesuaian model adalah AIC.Alur kerja yang sama yang dijelaskan di atas digunakan untuk mendapatkan rasio odds.
Untuk informasi lebih lanjut mengenai desain studi, lihat abstrak studi Alam yang ditautkan ke artikel ini.
Surat dan permintaan materi harus ditujukan kepada Dr. Martin Scarr atau Profesor Andrew Godkin.Artikel ini memberikan data asli.
Kode R yang digunakan untuk membuat model statistik tersedia untuk umum tanpa permintaan29.Informasi cetak ulang dan lisensi dapat ditemukan di www.nature.com/reprints.
Munro, APS dkk.Keamanan dan imunogenisitas tujuh vaksin COVID-19 sebagai dosis ketiga (booster) setelah dua dosis ChAdOx1 nCov-19 atau BNT162b2 (COV-BOOST) di Inggris: uji coba fase 2, blinded, multisenter, acak, dan terkontrol.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV dkk.Imunogenisitas, keamanan, dan reaktogenisitas vaksinasi primer heterolog terhadap COVID-19 (Com-COV2) menggunakan mRNA, vektor virus, dan vaksin tambahan protein di Inggris: uji coba fase 2, tersamar tunggal, acak, dan uji non-inferioritas.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB dkk.Kemanjuran Vaksin COVID-19 pada Pasien dengan Gangguan Imunokompromais: Tinjauan Sistematis dan Analisis Meta.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. dkk.Penurunan netralisasi SARS-CoV-2 mikron varian B.1.1.529 oleh serum setelah imunisasi.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y, dan Baliser RD Infeksi terobosan pada individu yang divaksinasi SARS-CoV-2: pengukuran, penyebab, dan konsekuensi.Imam Nasional Imunologi.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG dkk.Melemahnya respon imun humoral terhadap vaksin Covid-19 BNT162b2 selama 6 bulan.N.eng.J.Kedokteran.385, e84 (2021).
Carreño, JM dkk.Aktivitas serum penyembuhan dan vaksin terhadap SARS-CoV-2 Omicron.Alam 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. dkk.Durasi perlindungan vaksin mRNA Qatar terhadap subvarian SARS-CoV-2 Omicron BA.1 dan BA.2.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ dkk.Frekuensi sel memori B menurun seiring dengan terobosan infeksi vaksin delta COVID-19.EMBO Pengobatan Molekuler.14, e15227 (2022).
Kundu, R. dkk.Sel T memori reaktif silang dikaitkan dengan perlindungan kontak COVID-19 dari infeksi SARS-CoV-2.komune nasional.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH dkk.Respons sel T dan sel B reaktif omikron SARS CoV-2 yang khas pada penerima vaksin COVID-19.ilmu.Imunologi.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu dkk.Sel T spesifik SARS-CoV-2 yang diwarisi mampu mengenali silang varian Omicron.pengobatan nasional.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ dkk.Pengukuran sel T spesifik SARS-CoV-2 dari darah utuh menunjukkan infeksi tanpa gejala dan imunogenisitas vaksin pada individu sehat dan pasien dengan kanker organ padat. Imunologi https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT dkk.Pengukuran cepat sel T lonjakan SARS-CoV-2 di seluruh darah individu yang divaksinasi dan terinfeksi secara alami.J. Klinis.menginvestasikan.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, UE dkk.Respon Vaksin COVID-19 pada Pasien Multiple Sclerosis.Install.Neuron.91, 89–100 (2022).
Bradley RE dkk.Infeksi COVID-19 yang persisten dengan sindrom Wiskott-Aldrich menghilang setelah vaksinasi terapeutik: sebuah laporan kasus.J. Klinis.Imunologi.42, 32–35 (2022).